结果:基因敲入效率效率提升高达 30% (较之常规质粒)
- CRISPR基因敲入(敲入2.5 kb 片段)
- 转座子基因敲入(敲入4.8 kb 片段)
服务名称 | 级别 | 目的基因长度* | 交付量* | 交付形式 | 周期 # | 应用领域 |
---|---|---|---|---|---|---|
GenCircle dsDNA |
工业级 | 1-50kb | 100μg - g |
冻干粉 / 液体 (缓冲液可选) |
11天起 |
|
临床前级 |
|
# 客户可以选择:1. 在金斯瑞合成基因后构建GenCircle dsDNA;2. 客户自己提供已经合成好的含目的基因的质粒直接构建GenCircle dsDNA。
* 其他目的基因长度和交付量欢迎详询,邮件发送至oligo@genscript.com.cn或拨打电话400-025-8686转5812或5815,专业技术支持为您服务。
# 此周期不含基因合成周期。
QC项目 | 标准 | 工业级 | 临床前级 |
---|---|---|---|
分光光度计 | 交付量保证 | ||
Sanger测序 | 100%序列正确 | ||
A260/280 | 1.8-2.0 | ||
限制性酶切分析 | 酶切后凝胶电泳分析与预期大小一致 | ||
宿主RNA残留AGE分析 | 条带不被检出 | ||
宿主DNA残留检测分析 | AGE灰度分析不被检出 (GIS=0) | ||
qPCR检测分析 (≤5%) | |||
质粒超螺旋含量AGE分析 | 超螺旋程度高级别质粒≥90% | ||
TAL内毒素检测 | ≤0.01EU/μg | ||
≤ 0.005 EU/μg | |||
生物负载检测 | 48小时无可见细菌/真菌生长 | ||
残留宿主蛋白 (HCP ELlSA) | ≤1% | ||
PH检测 | TE缓冲液:8.00±0.50 ddH2O:(5.00-7.00)±0.50 PBS:7.40±0.50 Tris:7.88±0.50 |
结果:基因敲入效率效率提升高达 30% (较之常规质粒)
结果:病毒滴度提升到高达 3倍 、ITR序列更稳定、规避抗性基因(较之常规质粒)
组别 |
病毒滴度 (IFU/ml) |
抗性基因 |
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pRRL-PGK-EGFP (常规质粒) |
1.23E+8 | 检出 (Ct value<30) |
pRRL-PGK-EGFP MF (GenCircle dsDNA) |
3.81E+8 | 未检出 (Ct≥35 ) |
组别 |
病毒滴度 (copies/ml) |
抗性基因 |
---|---|---|
CMV EGFP AAV2 (常规质粒) |
1.12E+12 | 2% |
CMV EGFP MF (GenCircle dsDNA) |
1.22E+12 | 未检出 |
结果:转录水平提升高达 4倍 ,减少免疫反应(较之常规质粒)
结果:蛋白表达水平提升高达 39% (较之常规质粒)
GenCircle dsDNA服务成功交付全球多个订单,涵盖不同长度的目的基因,包括多个难度项目。