金斯瑞提供超20,000种含有gRNA序列的plentiCRISPRV2质粒,所有sgRNA序列已经被MIT验证。在数据库中,您可通过搜索基因名称,基因标志或ID来查找相关gRNA。
服务 | 递送方式 | 筛选标记 | |
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GenCRISPR质粒库 | Lentiviral | Amp,Puro | gRNA数据库 |
为满足您多种需求,金斯瑞不仅提供多种Cas9类型的定制质粒,也提供经由MIT验证的空载供您选择。
根据Cas9类型,定制质粒包含如下几种:
1. 增强CRISPR/SpCas9质粒-eSpCas9New
特异性增强SpCas9(Enhanced specificity SpCas9,eSpCas9),指的是SpCas9(K848A/K1003A/R1060A),是经过MIT张锋实验室特异性改造的质粒(Slaymaker et al. 2016).eSpCas9可以降低脱靶效率,比自然SpCas9脱靶效率降低10倍之多,同时可实现基因高效编辑。
Cas9基因组编辑依赖于DNA双链的分离。sgRNA与非靶向DNA序列的不匹配可能导致非特异性结合和分裂。为了提高基因组编辑的特异性,科学家开发了突变为K848A、K1003A和R1060A的eSpCas9。在SpCas9的非靶链沟槽内中和这些带正电荷的残基,既可以减少非靶结合,也可以刺激靶向结合,这一操作需要更严格的Watson-Crick碱基配对。
服务 | 递送方式 | 筛选标记 | |
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eSpCas9质粒 | Plasmid Lentiviral |
Puro GFP |
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2. SpCas9质粒Hot
Cas9内切酶是基因编辑的研究标准。当与单导RNA(single guide RNA,sgRNA)序列结合时,这些酶在基因组中产生位点特异性双链断裂(double strand breaks,DSBs)。
服务 | 递送方式 | 筛选标记 | |
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SpCas9 Plasmids | Plasmid Lentiviral AAV |
Amp Amp,Puro Amp,Neo Amp,GFP |
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3. SpCas9 Nickase质粒
SpCas9 nickase(Cas9n D10A)包含一个突变,不同于SpCas9切割时形成DSB,SpCas9 nickase在切割序列时形成单链缺口。经过SpCas9 nickase切割后,两个相对的gRNA序列可以有效配对,因为这种方法可以避免不必要的插入。
服务 | 递送方式 | 筛选标记 | |
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SpCas9 Nickase Plasmids | Plasmid Lentiviral |
Amp Amp,Puro Amp,GFP |
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4. SaCas9质粒
黄色葡萄球菌Cas9同源体(Staphylococcus aureus Cas9 orthologue,SaCas9)是腺相关病毒(adeno-associated virus AAV AAV)应用的理想内切酶。SaCas9比SpCas9大约短1kb,这允许了在AAV组装时更加灵活。AAV载体较低的免疫原性,使SaCas9非常适合于体内编辑的。
服务 | 递送方式 | 筛选标记 | |
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SaCas9 plasmids | AAV | Amp | 获取报价 |
5. 转录激活(Transcription Activation,SAM)质粒
CRISPR/Cas9协同激活介质(SAM)系统已被设计用于激活下游目标的转录。SAM系统使用三种不同的激活因子,VP64、P65和HSF1,它们被组装到催化失活的Cas9(dead Cas9,dCas9)复合物上驱动转录。
服务 | 递送方式 | 筛选标记 | |
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SAM gRNA Plasmids | Plasmid Lentiviral |
Amp Amp,Zeo |
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SAM dCas9-VP64 Plasmids | Lentiviral | Amp,Blast Amp,GFP |
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SAM MS2-P65-HSF1 Plasmids | Lentiviral | Amp,GFP Amp,Hygro |
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为满足您的科研需要,金斯瑞提供空载服务,载体序列已经由MIT验证。这些载体包含一个17bp-1.8kb的可表达连接体,以代替定制的sgRNA序列,您可根据需要对其进行修改。
如果对于CRISPR 质粒有任何问题或建议,请联系金斯瑞专业技术支持人员。